制品内容 (Code No.: RR420A: 50 μl反应×200次)
TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (2X Conc.)*1
1.0 ml × 5
ROX Reference Dye (50×Conc.)*2
200 μl × 1
ROX Reference Dye II (50×Conc.)*2
200 μl × 1
*1 内含TaKaRa Ex Taq HS,dNTP Mixture,Mg2+,Tli RNaseH,TB Green。
*2 ROX Reference Dye是用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。例如使用Applied Biosystems的Real Time PCR扩增仪进行实验就需要校正。
需要使用ROX Reference Dye校正的仪器
Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System
Applied Biosystems StepOnePlus Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
需要使用ROX Reference Dye II校正的仪器
Applied Biosystems 7500和7500 Fast Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific)
不需要校正的仪器
Thermal Cycler Dice™ Real Time System III (Code No. TP950/TP970/TP980/TP990)
Thermal Cycler Dice Real Time System Lite (Code No.TP700/TP760)
Smart Cycler II System (Cepheid)
LightCycler/LightCycler 480 System (Roche Diagnostics)
CFX96 Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad)
制品说明
本制品是采用TB Green嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂。制品中含有Real Time PCR反应的最适浓度TB Green,是一种2X 浓度的Premix Type试剂,进行实验时,PCR反应液的配制十分方便简单。制品中使用了抗Taq抗体的Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq® HS,与Real Time PCR用适合Buffer组合,可以有效抑制非特异性的PCR扩增,大大提高PCR的扩增效率,可以进行高灵敏度的Real Time PCR扩增反应。另外,本制品中添加了Tli RNaseH(耐热性RNaseH),以cDNA作为模板进行PCR反应时,可以很好地抑制由于cDNA中残存mRNA对PCR反应造成的阻害作用。本制品适合于快速Real Time PCR扩增反应,可以在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线,对靶基因进行准确定量、检测,重复性好,可信度高。
保存
4℃可保存6个月。
避光保存,避免污染。
长期保存请置于-20℃。产品融解后请于4℃保存,并在6个月内用完。
试剂盒特长
1. 适用于Real Time PCR反应,可以快速、准确地对目的基因进行检测、定量。
2. 在2X 浓度的Premix中,预先混有TB Green,PCR反应液配制时,只需加入模板、引物、灭菌水便可进行Real Time PCR反应,操作简单方便。
3. DNA聚合酶使用了改良后的TaKaRa Ex Taq HS,可以进行Hot Start法PCR反应,再与Takara特别开发的Buffer系统相结合,具有高扩增效率,高扩增灵敏度之特点。
4. 在2X 浓度的Premix中,预先添加了耐热性RNaseH (Tli RNaseH),可以很好地抑制以cDNA作为模板进行PCR反应时,由于cDNA中残存mRNA对PCR反应造成的阻害作用。
注意事项
1. 使用前,请上下轻轻颠倒混匀,避免产生气泡,防止因混合不均匀造成的反应效果不佳。
(1) 请勿涡旋振荡混匀。
(2) TB Green Premix Ex Taq (2X conc.) 在-20℃存放可能会产生白色或淡黄色的沉淀,可用手握缓慢溶解,于室温短时间避光放置,轻柔上下颠倒混匀直至沉淀全部消失。
(3) 沉淀会导致溶液成分不均匀,使用前务必充分混匀试剂。
2. 配制反应液时,试剂请于冰上放置。
3. 本制品中含有荧光染料TB Green,配制PCR反应液时应避免强光照射。
4. 反应液的配制、分装请一定使用新的 (无污染的) 枪头、Microtube等,尽量避免污染。