CELLiGENT3D细胞培养基质胶套装CG0201-10
2022-01-20
产品详情
- 产地 新西兰
- 产品名称CELLiGENT3D细胞培养基质胶套装CG0201-10
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- 简介
CELLiGENT 3D 细胞培养基质胶套装
Catalog No. CG0201-2、CG0201-4、CG0201-10
Specification 2ml-kit、4ml-kit 、10ml-kit Storage 4℃保存、 保存两年
一、产品描述
CELLiGENT 3D 细胞培养基质胶套装包含整套胶体与试剂，可 3D 细胞培养与微环境应用等；本试剂盒操作便利且可调控基质胶硬度进行多种细胞培养测试；高分子胶体可快速形成水凝胶， 建议操作此培养胶体前详读此使用指南。
（CELLiGENT 3D 细胞培养基质胶套装为植物来源，无动物成分）
二、应用
· 三维细胞球体培养试验
· 适合用于三维细胞药物筛检平台
四、试剂盒组分
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CG0201-2、CG0201-4、CG0201-10
（对应数量和内容）
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货号.
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Components
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Amount
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Content
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CG0201-A
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A 基质胶 (2X)
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4、8、20
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0.5mL / tube
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CG0201-C
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C 缓冲溶液 (10X)
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1、2、1
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1*10ml、2*10ml、1*50 mL / BT
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CG0201-D
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D 缓冲溶液 (10X)
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1、2、1
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1*10ml、2*10ml、1*50 mL / BT
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五、使用步骤：
A.试剂制备
A 基质胶：将A 基质胶溶于 37℃水浴槽回温 10 分钟， 确认完全融解.
C 缓冲溶液(1X)制备：使用前将 10X C 缓冲溶液用冰的无细胞培养液(例如： 无血清 DMEM、opt-MEM) 制备成 1X C 缓冲溶液。(不要用 PBS 稀释 C 缓冲液) .
D 缓冲溶液(1X)制备: 使用前用冷的 1x PBS 稀释 10X D 缓冲溶液至 1X D 缓冲溶液.
B. CELLiGENT 3D细胞培养基质胶的制备
全部步骤需要在无菌环境内操作，操作步骤如下：
1. 将 24孔培养板放置于冰上预冷。
2. 细胞计数后取 2×105~2×107 细胞与 0.5 毫升 37℃ 细胞培养基均匀混合，并与 0.5 毫升 37℃ A 胶按照 1:1 等比例均匀混合，最终细胞密度 105~107cells/mL。注：请选择适当的培养溶液与条件进行试验。
3. 取 20-40 微升步骤 2 的混合液滴于 步骤 1 预冷的培养板上，胶体将于 5 分钟内成胶。 注: 测试胶体是否成胶，可用微量吸管尖温和的触碰胶体表面进行确认。
4. 待胶体成胶后，添加 1 毫升冰的 1X C 缓冲溶液，并盖过步骤 3 的胶溶液，固定 15 分钟。
5. 待 15 分钟固定后，小心的吸取 C 缓冲溶液并置换为适合此细胞生长之培养基溶液。
6. 将含有细胞的胶于 37°C 二氧化碳培养箱内进行 7~14 天的培养，并观察细胞球体的形成，按正常培养基更换频率进行更换操作。
C、溶胶与收集细胞球体准备程序
小心的将培养基吸取移除，并用 1X PBS 进行清洗。小心的将 1X PBS 吸取移除，并添加 1 毫升冰的 D 缓冲溶液，盖过胶滴于室温反应 5 分钟。温和的用 1 毫升移液管吸取，直到胶滴完全溶解。将含有细胞球体的溶液吸入 1.5 毫升离心管，用 1000 rpm 的转速离心 10 分钟，移除上清液体并收集细胞球体做分析。
D、收集单颗细胞准备程序
在分离单细胞前，先按上述溶胶与收集细胞球体准备程序进行操作
1. 添加 trypsin-EDTA 并与收集的细胞球体于 37°C 混合反应。
2. 用 1 毫升移液管混合，直到细胞体完全分解。
3. 待细胞球体完全分解，加入 3 倍体积的 1X PBS，并用 1000 转的转速进行离心 10 分钟，并移除上清液体收集沉淀的单细胞做分析。
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