■ 制品内容 (50 次量)
本试剂盒分Part I 与 Part II两部分。
□ Part I -20℃保存
□ Part II 室温 (15-25℃) 保存
50×DTT Solution
700 μl
Recombinant DNase I (RNase-free;5 U/μl)
1,000 U
10×DNase I Buffer
1 ml
30ml
15ml
*1操作前请在Buffer RL中加入50×DTT Solution,每1 ml的Buffer RL中加入20 μl 的50×DTT Solution。
Buffer PE
28ml
Buffer NB
1.5 ml × 2
Buffer RL*1*2
28ml
Buffer RWA*2
28ml
Buffer RWB*3
RNase Free dH2O
RNA Spin Column
50 套
RNase Free Collection Tube (1.5 ml)
50 支
此裂解液*现用现配。加入50×DTT Solution的Buffer RL裂解液可在室温下放置1个月。
*2含有强变性剂,应避免与皮肤、衣物等接触。若不小心接触到眼睛或皮肤时,请立即到医院进行处理。
*3*使用前,向Buffer RWB中添加70 ml的100%乙醇。
■ 制品说明
本试剂盒是小量提取植物组织Total RNA的试剂盒。试剂盒采用了特别的裂解系统,可以对各种简单的植物组织材料 (叶片、茎、幼苗等) 、富含多糖多酚的植物组织材料 (果实、种子等) 、真菌等进行RNA的提取,适用范围广泛。按照标准流程,使用本试剂盒可以有效提取分子量大于200 nt的RNA,也可以按照可选步骤提取得到包含Small RNA (<200 nt) 的Total RNA。试剂盒中包含了RNA提取所需的全部试剂,无需额外购买其它试剂。
本试剂盒具有高效、快速、方便之特点,组织或细胞裂解后,提取操作仅需30分钟便可完成。提取过程中无需苯酚氯仿抽提等步骤。利用该试剂盒提取的RNA纯度高,很少含蛋白质及基因组DNA污染。使用本试剂盒可以从50~100 mg植物组织中纯化得到多至数十微克的高纯度RNA。提取得到的RNA可以直接用于Northern杂交、斑点杂交、mRNA纯化、体外翻译、RNA分解酶的保护分析、RT-PCR、Real Time RT-PCR、构建cDNA文库等各种分子生物学实验。
■ 保存与运输
1. 本试剂盒Part I部分在-20℃保存和运输。
2. 本试剂盒Part II部分可以在室温下 (15~25℃) 保存和运输。
■ 实验操作流程图
■ 注意事项
1. Buffer RL 若出现沉淀,请于60℃加热溶解,待恢复至室温后使用。
2. 操作前请在Buffer RL中加入50×DTT Solution至终浓度为2%,即每1 ml的Buffer RL中加入20 μl的50×DTT Solution。此裂解Buffer*现用现配。加入50×DTT Solution的Buffer RL可在室温放置1个月。
3. Buffer PE 若出现沉淀,请于37℃加热溶解,待恢复至室温后使用。
4. Buffer RWB在*使用前,请添加70 ml的100%乙醇,混合均匀。
5.RNA Spin Column的*容积为600 μl,使用时如果液体的体积超出*容积,请分批加入。
6.实验操作如无特殊说明,均在室温进行。